《蜘蛛侠：平行宇宙》这部电影中汇聚了来自不同平行宇宙的多位蜘蛛侠角色，以下是主要的几位：迈尔斯·莫拉莱斯（Miles Morales）：他是本片的主角，一个来自与主宇宙不同的少年，获得了蜘蛛侠的能力，并在电影中学习如何成为一位英雄。彼得·帕克（Peter Parker）：来自一个与迈尔斯不同的宇宙，这位彼得·帕克是一位成熟的蜘蛛侠，他在迈尔斯的宇宙中担任了导师的角色。格温·史黛西（Gwen Stacy）/蜘蛛女（Spider-Woman）：来自一个她的宇宙中，格温·史黛西是蜘蛛侠，而不是彼得·帕克。暗影蜘蛛侠（Spider-Man Noir）：来自1930年代的宇宙，这位蜘蛛侠是一个更为黑暗、侦探风格的人物。潘妮·帕克（Peni Parker）：来自一个高度发达的科技宇宙，她驾驶着一个巨大的机械蜘蛛，并且与蜘蛛侠机器人有着精神链接。蜘猪人（Spider-Ham）：来自一个卡通宇宙，他是一个半人半猪的蜘蛛侠，原名彼得·波克（Peter Porker）。亚伦·戴维斯（Aaron Davis）/普里梅（Prong）：虽然不是蜘蛛侠，但他在电影中扮演了重要角色，是迈尔斯的叔叔，也是一位窃贼。迈尔斯的宇宙中的彼得·帕克（Ultimate Peter Parker）：在电影的某个时刻，观众看到了迈尔斯宇宙中的彼得·帕克的悲剧结局，他是金并对撞机实验的受害者之一。这些角色在电影中共同面对敌人，相互协助，最终阻止了金并的阴谋，并且修复了不同宇宙之间的裂缝。《蜘蛛侠：平行宇宙》通过这些角色展示了蜘蛛侠身份的多样性和丰富性。
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